Periostin过表达对鼻咽癌6-10B细胞侵袭和迁移的影响及机制

目的探讨外源表达periostin蛋白对鼻咽癌(NPC)6-10B细胞侵袭和迁移能力的影响及机制。方法采用脂质体转染技术建立稳定高表达periostin的6-10B细胞,RT-PCR结合Western blotting检测转染效率,Tanswell分析periostin高表达后6-10B细胞侵袭和迁移能力的改变,明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶(MMPs)活性的变化;免疫组织化学检测整合素(integrin)αvβ5在转染periostin前后6-10B细胞中的表达以及其与periostin在鼻咽癌和正常鼻咽黏膜组织中的表达,image-pro Plus 6.0软件进行图像分析及吸光度测定,统计学分析鼻咽癌组织中periostin和integrinαvβ5表达强度的相关性。结果 Periostin过表达的6-10B细胞侵袭、迁移能力明显增强,细胞培养上清中MMP-2、MMP-9活性增加,integrinαvβ5在periostin过表达的6-10B细胞及NPC组织的表达明显强于对照组,Spearman相关性分析显示,integrinαvβ5和periostin在NPC组织中的表达强度成正相关(r=0.682,P=0.000)。结论外源表达periostin能促进NPC的侵袭和转移,其机制可能是通过与NPC细胞膜上integrinαvβ5受体结合而提高MMPs的活性。     

高同型半胱氨酸血症兔动脉粥样硬化模型炎性介质的变化及意义

目的：探讨高同型半胱氨酸血症(HHcy)与动脉粥样硬化(AS)炎症反应的关系。方法：将20只雄性家兔随机分为对照组和实验组（每组10只），采用皮下注射DL-蛋氨酸制作HHcy模型，采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测各组家兔血清同型半胱氨酸（Hcy）、IL-1β、IL-6和IL-8水平，并观察家兔主动脉病理学形态改变，免疫组化染色观察并计算核因子-κB(NF-κB)的阳性细胞数。结果：实验组血清Hcy、IL-1β、IL-6和IL-8水平明显高于对照组（P<0.05）；肉眼可见实验组家兔主动脉可见斑块形成，斑块部位的动脉壁增厚、变硬；镜下可见对照组主动脉血管内皮层内皮细胞及内弹力板连续规整，中膜平滑肌细胞排列整齐，实验组可见局部内皮细胞坏死脱落及内弹力板损伤断裂，中膜平滑肌细胞胞核固缩且排列紊乱；实验组NF-κB阳性细胞数明显高于对照组（P<0.05）。结论：炎性因子的过多分泌可能是HHcy促进AS的重要机制之一，而NF-κB在此过程中同样发挥了重要的介导作用。     

MIF和VEGF在卵巢癌组织中的表达及其与微血管密度的关系

目的：观察巨噬细胞移动抑制因子（MIF）和血管内皮细胞生长因子（VEGF）在卵巢癌组织中的表达并计数微血管密度（MVD）,探讨MIF和VEGF与卵巢癌发生的关系及在卵巢癌血管生成中的作用。方法：利用免疫组织化学染色技术检测MIF、VEGF和第八因子相关抗原在卵巢癌组织和正常卵巢组织中的表达;采用Image Pro Plus（IPP）6.0图像分析软件对结果进行分析。结果：MIF和VEGF在正常卵巢组织的实质细胞中不表达,在卵巢癌肿瘤细胞的胞浆呈阳性表达,且随着卵巢癌分化程度的降低,表达强度逐渐增强;低分化卵巢癌与高分化和中分化卵巢癌比较差异有显著性（P<0.05或P<0.01）。低分化卵巢癌组织中的MVD(50.83±11.59)明显增加,与正常卵巢组织(18.16±2.26)、高分化(19.88±3.92)及中分化(31.1±3.08)卵巢癌组织比较差异有显著性（均P<0.01）。MIF表达与VEGF表达呈正相关（r=0.579　7,P<0.01）,MIF表达与卵巢癌MVD呈正相关（r=0.962　3,P<0.001）。结论：MIF的表达与卵巢癌的分化程度密切相关,MIF可能通过上调VEGF表达促进卵巢癌的肿瘤血管生成。     

子宫内膜癌患者外周血细胞CK20 mRNA的表达及其临床意义

目的:检测子宫内膜癌患者外周血细胞中细胞角蛋白 20(CK20)基因 mRNA表达,探讨其表达对子宫内膜癌微转移的诊断价值。方法: 采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测44例子宫内膜癌患者、34例子宫良性病变患者和 32名健康志愿者外周血细胞中CK20 mRNA表达水平,分析其表达与子宫内膜癌患者病理学参数之间的关系。结果: 44例子宫内膜癌患者外周血细胞CK20 mRNA检测出阳性12例,阳性率为27.3％;子宫良性病变患者及健康女性外周血中均未见其表达,子宫内膜癌患者CK20 mRNA阳性表达率高于子宫良性病变患者及健康女性（χ2=20.204,P<0.05）;子宫内膜癌患者外周血细胞CK20 mRNA 表达水平与临床分期（χ2=16.712,P<0.05）、淋巴结转移（χ2=6.381,P<0.05）和浸润深度（χ2=6.381,P<0.05）存在关联性,而与病理分级（χ2= 0.229,P>0.05）及是否绝经（χ2=0.004,P>0.05）无关联。结论:相对于子宫良性病变患者及健康女性,CK20 mRNA在子宫内膜癌患者中阳性表达率明显升高,且表达水平与临床分期、是否有淋巴结转移及浸润深度有关;CK20的特异性强,可作为判断子宫内膜癌血源性微转移的参考指标。     

人sFlt-1基因转染骨髓基质细胞对K562细胞生长的影响

目的：通过转基因的方法获得人可溶性血管内皮生长因子受体1（sFlt-1）蛋白的稳定表达,并检测其对K562细胞生长的影响。方法：构建真核表达载体pcDNA₃-sFlt-1_D4,用脂质体介导的方法将其转染骨髓基质细胞,采用RT-PCR、ELISA和MTT法检测转基因产物的表达及对K562细胞生长的影响。 结果：流式细胞仪检测骨髓基质细胞的转染率为9.27％。ELISA法检测转染后24 h、48 h及4周转基因骨髓基质细胞培养上清中sFlt-1_d4蛋白的表达浓度分别为（0.104±0.078 ）、(0.158±0.022) 和（0.171±0.069 ） μg•L^-1。ELISA法证实转基因组培养上清中VEGF含量降低。MTT法检测转染24h、48h及4周的转基因产物对K562细胞的抑瘤率分别为9.41%±4.71%、23.63%±7.50%和33.13%±6.93%。 结论：转基因方法可以获得sFlt-1_D4蛋白的表达,转基因蛋白具有抑制K562细胞生长的作用。     

共表达基因疫苗MAGE-1/IL-18的抗肿瘤免疫治疗作用

目的观察已构建的共表达基因疫苗pcIL-18-MAGE诱导特异性免疫应答的能力和抗肿瘤免疫治疗作用。方法共表达疫苗肌注小鼠,间隔十天加强免疫一次,共免疫三次,以pcMAGE-1、 pcIL-18、pcDNA3和PBS为对照,检测小鼠脾细胞上清液IL-12和IFN-γ的浓度、脾细胞CTL杀伤活性及小鼠T细胞亚群情况;观察基因疫苗免疫MAGE (+)小鼠的成瘤时间和生存时间。结果pcIL-18-MAGE质粒免疫的小鼠,其脾细胞对SMMC-7721的杀伤率最高,与各对照组相比,差异有统计学意义;脾细胞CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺ T细胞和上清液中细胞因子IL-12和IFN-γ均明显升高。共表达疫苗免疫MAGE (+)小鼠后,小鼠成瘤时间明显延迟,生存时间明显延长。结论共表达基因疫苗pcIL-18-MAGE在实验动物体内有显著的诱导特异性抗肿瘤免疫作用,且对肿瘤的生成有一定的抑制作用。     

121例糖尿病患者神经电生理分析

[摘要] 目的 探讨神经电生理指标在糖尿病患者中的变化及其临床意义。方法 按病程(以 10 年分界)分组 对 121 例糖尿病患者的神经电生理检测结果进行分析。结果 病程 ≥10 年组运动神经的正中神经、腓总神经和胫 神经传导速度下降异常率增加( P <0.05 ),正中神经、尺神经潜伏期延长异常率高于 <10 年组( P <0.05 );周围运 动神经波幅下降异常率也增高,但差异无统计学意义( P >0.05 )。病程 ≥10 年组感觉神经的正中神经、尺神经和 桡神经传导速度下降异常率增加( P <0.05 );正中感觉神经波幅降低异常率增高( P <0.05 )。结论 对糖尿病患者 定期进行神经电生理检查,有助于糖尿病周围神经病的早期发现、早期治疗。     

肝细胞生长因子受体在宫颈癌组织中的表达及其与增殖细胞核抗原的关系

目的：研究肝细胞生长因子受体（c-met）在宫颈癌中的表达，探讨其与增殖细胞核抗原（PCNA）的关系。方法：运用免疫组化（SP）方法检测14例慢性宫颈炎和50例宫颈癌组织中c-met及PCNA的表达率。结果：在慢性宫颈炎组织，c-met表达阳性率为14.3%（2/14），而在宫颈癌组织，其表达阳性率为62.0%（31/50），两者比较差异有显著性（P<0.05）。组织分化程度低组c-met表达率高于分化程度高组（P<0.05），淋巴结转移组的c-me t表达率明显高于无淋巴结转移组（P<0.05），鳞癌组与腺癌组c-met表达率比较差异无显著性（P>0.05），临床Ⅰ期和Ⅱ期组c-met表达量比较差异无显著性（P>0.05）。在慢性宫颈炎组织中，PCNA指数为24.79%±5.1%，在宫颈癌组织中，PCNA指数为39.9%±15.46%，两者比较差异有显著性（P<0.05）。组织分化程度越低、临床分期越晚PCNA的表达量越高(P<0.05)，鳞癌组与腺癌组的PCNA表达量比较差异无显著性（P>0.05）。c-met阳性表达组的PCNA指数明显高于c-met阴性表达组（P<0.01）。结论：c-met的表达与PCNA密切关联，可作为评估宫颈癌预后的一个指标。     

抗精神病药奎硫平对大鼠海马神经元死亡和细胞周期的影响

目的：探讨抗精神病药奎硫平对谷氨酸损伤的海马神经元凋亡、坏死及细胞周期的影响,阐明其对神经系统的作用机制。方法：采用体外原代培养的大鼠海马神经元,复制谷氨酸损伤模型,实验分为正常对照组、谷氨酸损伤组和奎硫平（0.1、1.0、10.0、50.0、100.0、200.0和500.0 μmol•L^-1）组,在体外通过流式细胞术（FCM）测定奎硫平应用前后神经元凋亡、坏死和细胞周期的改变。结果：谷氨酸损伤组较正常对照组细胞凋亡率增加 (P<0.01 );与谷氨酸损伤组比较,50.0~ 200.0 μmol•L^-1奎硫平组细胞凋亡率降低（P<0.05,P<0.01）。谷氨酸损伤组坏死细胞较正常对照组升高2.9倍 (P<0.05 );与谷氨酸损伤组比较,0.1 μmol•L^-1奎硫平组坏死细胞比例降低 (P<0.05 ),为谷氨酸损伤组的52.0%。与正常对照组比较,谷氨酸损伤组G0/G1期细胞百分数增加 (P<0.001）,S期细胞百分数下降（P<0.01）,G2+M期细胞百分数变化不明显。与谷氨酸损伤组比较,200.0 μmol•L-1奎硫平组G0/G1期细胞百分数降低 (P<0.05 ),为谷氨酸损伤组的68.9%;S期细胞百分数升高 (P<0.05 ),为谷氨酸损伤组的3.4倍。结论：奎硫平能够抵抗谷氨酸诱导的神经元损伤,减少细胞凋亡和坏死,改变细胞周期进程。     

血浆中糖化血红蛋白和3-硝基酪氨酸检测在糖尿病及其并发症诊断中的应用

目的：检测糖尿病（DM）及其并发症患者糖化血红蛋白（HbAlc）、3-硝基酪氨酸（3-NT）及其他生化指标的水平,探讨上述指标与DM及其并发症的关系,为DM患者的早期诊断及治疗提供依据。方法：选择DM患者64例,其中单纯DM患者18例（单纯DM组）,DM并发症患者
46例（DM并发症组）,其中并发周围神经病变患者16例（DM并发周围神经病变组）,并发其他并发症患者30例（DM并发其他并发症组）;选择正常对照20人(正常对照组)。分别检测各组研究对象的HbA1c、3-NT、空腹血糖（FBG）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、血尿素氮（BUN）、血肌酐（Cre）水平。结果：单纯DM组和DM并发症组患者的HbA1c、3-NT、FBG、TG和Cre水平均高于正常对照组(P<0.05);DM并发其他并发症组、DM并发周围神经病变组的3-NT水平明显高于单纯DM组(P<0.05);3-NT和TG水平随DM并发症的病情进展有逐渐升高的趋势,以DM并发周围神经病变组为最高。多元逐步回归分析,体质量指数(BMI)、TC与3-NT水平呈线性回归关系(r=0.272,r=0.216,P<0.05)。结论：HbAlc和3-NT对DM及其并发症的早期诊断及治疗监测具有重要意义,3-NT的检测对于DM并发症的进一步诊断有重要意义。